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ELISA試劑盒在使用時有什么技巧?

日期:2021-10-21瀏覽:839次

 
  ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的試驗確診方法。盡管ELISA試劑盒的操作過程看似簡單,但沒做到位的話就會影響試驗的作用。
  ELISA試劑盒在使用時有什么技巧?
  1、切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
  2、合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
  3、在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
  4、務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
  5、樣品稀釋液應用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。
  6、為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。
  7、在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。
  8、ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
  9、剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5、0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
  10、人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
  11、每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
  12、手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
  13、對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
  14、沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
  15、吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
  16、吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。
  17、未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。

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